اندازه گیری اسیدهای نوکلئیک در اسپکتروفتومتر
اندازه گیری اسیدهای نوکلئیک است که بیشترین استفاده از یک اسپکتروفتومتر است. Oligonucleotides، یک رشته، DNA دو رشته و RNA را می توان در بافر اندازه گیری کرد. پیک جذب بالاترین میزان جذب اسید نوکلئیک 260 نانومتر است. هر اسید نوکلئیک ترکیبی مولکولی متفاوت دارد و بنابراین دارای فاکتورهای تبدیل متنوع است. برای اندازه گیری انواع مختلف اسیدهای نوکلئیک، ضرایب مربوطه را در پیش انتخاب کنید. به عنوان مثال، جذب 1OD برابر با dsDNA 50μg / ml، ssDNA 37μg / ml، RNA 40μg / ml و 30μg / ml Olig است. مقدار جذب پس از آزمون توسط ضریب بالا برای تبدیل غلظت نمونه مورد نظر تبدیل می شود. قبل از آزمایش، روش صحیح را انتخاب کنید، حجم راه حل سهام و رقیق را وارد کنید، و راه حل های خالی و نمونه را آزمایش کنید. با این حال، آزمایش آسان نبود. خوانش نامناسب ممکن است بزرگترین سردرد برای آزمایشکنندگان باشد. حساسیت دستگاه بیشتر است، بیشتر جذب جذب رگبار شده است.
در واقع، اصل طراحی و اصل کار اسپکتروفتومتر اجازه می دهد که مقدار جذب در یک محدوده خاص تغییر کند، به این معنی است که دستگاه دارای درجه و دقت و صحت خاصی است. مانند دقت اپتیورتور بیوفوتومتر ≤ 1.0٪ (1A). نتایج این آزمون های چند متغیر بین میانگین 1.0٪ و همه طبیعی است. علاوه بر این، خواص فیزیکی و شیمیایی اسید نوکلئیک، pH بافر برای حل اسید نوکلئیک، غلظت یون، و غیره نیز باید مورد توجه قرار گیرد: در طول آزمایش غلظت یون بیش از حد بالا نیز باعث می شود خواندن راندگی به عنوان TE، که تا حد زیادی تثبیت خواندن. غلظت رقیق نمونه نیز یک عامل غیر قابل ملاحظه است: به دلیل حضور اجتناب ناپذیر ذرات کوچک در نمونه، به ویژه نمونه های اسید نوکلئیک. حضور این ذرات کوچک با اثر آزمایش مواجه می شود. به منظور به حداقل رساندن تاثیر ذرات بر نتایج آزمایش، جذب اسید نوکلئیک حداقل باید 0.1 A باشد، و جذب مطلوب تر از 0.1-1.5 A باشد. در این محدوده، هیچ حبابی نباید در مخلوط، و هیچ تعلیق در خالی وجود ندارد. در غیر این صورت، قرائت ها به شدت رانده می شوند؛ برای آزمون قطعه و نمونه، باید یک فنجان کالریمتریک مورد استفاده قرار گیرد. در غیر این صورت، تفاوت غلظت خیلی زیاد است ضریب تبدیل و واحد غلظت نمونه یکسان هستند. کوته پوشیده شده توسط پنجره؛ حجم نمونه باید بیش از حد لازم فنجان رنگ و غیره باشد.
علاوه بر غلظت اسید نوکلئیک، اسپکتروفتومتر به طور همزمان برای نشان دادن خلوص نمونه مانند نسبت A260 / A280 چندین نسبت بسیار مهم را برای ارزیابی خلوص نمونه نشان می دهد، زیرا پیک جذب پروتئین 280 نانومتر است نمونه های خالص یک نسبت بزرگتر از 1.8 (DNA) یا 2.0 (RNA) دارند. اگر نسبت کمتر از 1.8 یا 2.0 باشد، این نشان دهنده وجود پروتئین یا مواد فنلی است. A230 نشان می دهد که در نمونه نمونه ای از آلاینده ها مانند کربوهیدرات ها، پپتیدها، فنل ها و غیره وجود دارد. نسبت اسید نوکلئیک A260 / A230 بیشتر از 2.0 است. A320 کدورت راه حل و دیگر عوامل دخالت را تشخیص می دهد. نمونه خالص، A320 به طور کلی 0 است.
این شرکت متخصص در فروش اسپکتروفتومتر است ، به مشتریان خوش آمدید که نیاز به مشاوره و خرید دارند، ما به شما خدمات صادقانه و کیفیتی، و همچنین قیمت پایین تر ارائه می دهیم.
پست الکترونیکی: info@sumerlab.com